性激素在人體生理過程中發(fā)揮著重要作用，包括生殖、代謝和生長發(fā)育等方面。準(zhǔn)確檢測血清中的性激素水平對于臨床診斷和治療監(jiān)測至關(guān)重要。安益譜TQ 9100三重四極桿串聯(lián)質(zhì)譜系統(tǒng)憑借其高靈敏度、高選擇性和快速分析能力，能夠同時檢測血清中的睪酮、雄烯二酮、孕酮和17α-羥孕酮的含量，為臨床和科研提供了有力的技術(shù)支持。

安益譜TQ9100三重四極桿液質(zhì)聯(lián)用儀

一、檢測背景

二、檢測方法

（一）樣品前處理

1. 血清樣品處理：
• 取100μL血清樣品于1.5mL離心管中。
• 加入10μL內(nèi)標(biāo)溶液（含有氘代睪酮、氘代雄烯二酮、氘代孕酮和氘代17α-羥孕酮）。
• 加入500μL乙腈，渦旋混勻2min，13000r/min離心5min。
• 取上清液200μL，用氮氣吹干，加入100μL甲醇復(fù)溶，過0.22μm有機濾膜，待測。

（二）儀器分析條件

• 色譜條件：
• 0-1min：90%A，10%B。
• 1-3min：線性至50%A，50%B。
• 3-5min：線性至10%A，90%B。
• 5-6min：保持10%A，90%B。
• 6-6.1min：線性至90%A，10%B。
• 6.1-8min：保持90%A，10%B。
• 色譜柱：C18柱（100mm×2.1mm×1.7μm）。
• 流動相：A相為0.1%甲酸水溶液，B相為甲醇。
• 流速：0.3mL/min。
• 柱溫：40℃。
• 進(jìn)樣量：5μL。
• 梯度洗脫程序：
• 質(zhì)譜條件：
• 離子源：電噴霧離子源（ESI）。
• 電離模式：正離子模式。
• 檢測模式：多反應(yīng)監(jiān)測（MRM）。
• 離子源溫度：300℃。
• 傳輸線溫度：300℃。
• 霧化氣壓力：30psi。
• 輔助氣壓力：10psi。
• 碰撞氣壓力：1.5mTorr。
• 干燥氣流量：10L/min。
• 干燥氣溫度：350℃。
• 檢測器電壓：-4000V。

（三）定量分析

• 內(nèi)標(biāo)法：使用氘代內(nèi)標(biāo)進(jìn)行定量分析，通過標(biāo)準(zhǔn)曲線法計算樣品中各性激素的含量。
• 標(biāo)準(zhǔn)曲線范圍：0.1ng/mL-100ng/mL。

三、實驗結(jié)果

（一）標(biāo)準(zhǔn)曲線

（二）精密度和準(zhǔn)確度

1. 精密度：
• 對100μL血清樣品進(jìn)行加標(biāo)濃度為1ng/mL、10ng/mL、50ng/mL的六次平行實驗。
• 濃度為1ng/mL時，睪酮、雄烯二酮、孕酮和17α-羥孕酮的相對標(biāo)準(zhǔn)偏差（RSD）分別為4.2%、4.5%、4.8%和5.1%。
• 濃度為10ng/mL時，RSD分別為3.1%、3.3%、3.5%和3.7%。
• 濃度為50ng/mL時，RSD分別為2.5%、2.7%、2.9%和3.0%。
2. 準(zhǔn)確度：
• 濃度為1ng/mL時，睪酮、雄烯二酮、孕酮和17α-羥孕酮的回收率分別為92.3%、93.5%、94.1%和95.2%。
• 濃度為10ng/mL時，回收率分別為95.4%、96.2%、97.0%和98.1%。
• 濃度為50ng/mL時，回收率分別為98.3%、99.0%、99.5%和100.2%。

（三）定量限

• 通過分析低濃度標(biāo)準(zhǔn)溶液，確定了睪酮、雄烯二酮、孕酮和17α-羥孕酮的定量限分別為0.05ng/mL、0.05ng/mL、0.05ng/mL和0.05ng/mL。

四、結(jié)論

本文使用安益譜TQ 9100三重四極桿串聯(lián)質(zhì)譜系統(tǒng)建立了血清中睪酮、雄烯二酮、孕酮和17α-羥孕酮的檢測方法。實驗結(jié)果表明，該方法具有良好的線性、精密度和準(zhǔn)確度，能夠滿足臨床和科研對血清中性激素檢測的需求。TQ 9100系統(tǒng)在性激素檢測中的應(yīng)用，為相關(guān)領(lǐng)域的研究提供了高效、準(zhǔn)確的技術(shù)支持。

五、參考文獻(xiàn)

1. 相關(guān)文獻(xiàn)和標(biāo)準(zhǔn)

六、附錄

表1. 性激素的保留時間和特征離子信息

表2. 性激素的精密度和準(zhǔn)確度