安益譜 TQ8100 三重四極桿氣質(zhì)聯(lián)用儀在短鏈脂肪酸測(cè)定中的應(yīng)用
摘要
短鏈脂肪酸（SCFAs）在生物醫(yī)學(xué)、環(huán)境科學(xué)和食品科學(xué)等領(lǐng)域具有重要的研究和應(yīng)用價(jià)值。安益譜 TQ8100 三重四極桿氣質(zhì)聯(lián)用儀憑借其卓越的性能，為短鏈脂肪酸的測(cè)定提供了一種高效、準(zhǔn)確的解決方案。本文介紹了該儀器在短鏈脂肪酸測(cè)定中的應(yīng)用方法，包括樣品前處理、色譜和質(zhì)譜條件的優(yōu)化，以及實(shí)際樣品分析的結(jié)果。
安益譜TQ8100三重四極桿氣質(zhì)聯(lián)用儀
1. 引言
短鏈脂肪酸（SCFAs）是由腸道微生物通過(guò)發(fā)酵未被消化的食物中的纖維素產(chǎn)生的有機(jī)酸，主要包括乙酸、丙酸和丁酸等。這些脂肪酸在維持腸道健康、調(diào)節(jié)免疫、抗炎和保護(hù)腸道屏障等方面發(fā)揮著重要作用。因此，準(zhǔn)確測(cè)定短鏈脂肪酸的含量對(duì)于相關(guān)領(lǐng)域的研究至關(guān)重要。
2. 實(shí)驗(yàn)部分
2.1 儀器與試劑
- 安益譜 TQ8100 三重四極桿氣質(zhì)聯(lián)用儀：配備電子轟擊離子源（EI）和三重四極桿質(zhì)譜檢測(cè)器。
- 標(biāo)準(zhǔn)品：乙酸、丙酸、丁酸等短鏈脂肪酸的標(biāo)準(zhǔn)品，純度 > 99%。
- 試劑：甲醇、乙腈、水（均為色譜純），甲酸（純度 > 98%）。
2.2 樣品前處理
短鏈脂肪酸的測(cè)定通常需要對(duì)樣品進(jìn)行適當(dāng)?shù)那疤幚恚源_保樣品中的目標(biāo)成分能夠被有效提取和檢測(cè)。例如，在測(cè)定腸道內(nèi)容物中的短鏈脂肪酸時(shí)，可以將樣品溶于甲醇溶液中，調(diào)節(jié) pH 值后離心取上清液進(jìn)行檢測(cè)。具體步驟如下：
- 稱取適量樣品（如 300 mg 小鼠盲腸內(nèi)容物）于離心管中。
- 加入適量溶劑（如 1.0 mL 甲基叔丁基醚和體積分?jǐn)?shù) 2.0% 的濃鹽酸）。
- 充分研磨、渦旋混勻后，在冰水浴中超聲 5 min。
- 在 4℃、10000 r/min 的條件下離心 10 min，取上清液過(guò) 0.22 μm 濾膜。
- 加入內(nèi)標(biāo)（如 1% 二乙基丁酸）后，于棕色進(jìn)樣瓶中待測(cè)。
2.3 色譜和質(zhì)譜條件
- 氣相色譜條件：
- 色譜柱：DB-FFAP 色譜柱（30 m × 0.25 mm × 0.25 μm）。
- 載氣：氮?dú)猓魉?1.0 mL/min。
- 柱溫程序：初始溫度 60℃，保持 5 min 后以 10℃/min 升溫至 160℃，維持 2 min，最后以 20℃/min 升溫至 220℃，維持 5 min。
- 進(jìn)樣口溫度：220℃。
- 進(jìn)樣量：1.2 μL。
- 分流比：10:1.
- 質(zhì)譜條件：
- 離子源：電子轟擊離子源（EI）。
- 掃描模式：多反應(yīng)監(jiān)測(cè)（MRM）模式。
- 監(jiān)測(cè)離子對(duì)：根據(jù)每種短鏈脂肪酸的質(zhì)譜圖譜選擇特征離子對(duì)。
3. 結(jié)果與討論
3.1 線性關(guān)系與檢出限
通過(guò)在不同濃度水平下對(duì)標(biāo)準(zhǔn)溶液進(jìn)行分析，考察了多反應(yīng)監(jiān)測(cè)（MRM）方法的線性關(guān)系。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，短鏈脂肪酸在 0.1 - 100 ng/mL 的濃度范圍內(nèi)均展現(xiàn)出良好的線性關(guān)系，相關(guān)系數(shù)（R2）均大于 0.999。在優(yōu)化條件下，檢出限可達(dá)低納克級(jí)，滿足實(shí)際檢測(cè)需求。
3.2 精密度與準(zhǔn)確度
為了驗(yàn)證方法的精密度和準(zhǔn)確度，對(duì)同一濃度水平的標(biāo)準(zhǔn)溶液進(jìn)行了多次重復(fù)分析，并計(jì)算了相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差（RSD）。結(jié)果表明，MRM 方法的 RSD 均小于 5%，表明該方法具有良好的精密度。同時(shí)，通過(guò)加標(biāo)回收實(shí)驗(yàn)，考察了方法的準(zhǔn)確度。加標(biāo)回收率在 90% - 110% 之間，進(jìn)一步驗(yàn)證了該方法的可靠性和準(zhǔn)確性。
3.3 實(shí)際樣品分析
將該方法應(yīng)用于實(shí)際樣品的分析，包括腸道內(nèi)容物、糞便和食品等。在所采集的樣品中，成功檢測(cè)到了多種短鏈脂肪酸，如乙酸、丙酸、丁酸等。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，該方法能夠快速、靈敏地檢測(cè)出樣品中的痕量短鏈脂肪酸，且檢測(cè)結(jié)果與已知的樣品信息相符，驗(yàn)證了該方法在實(shí)際應(yīng)用中的有效性。
4. 結(jié)論
安益譜 TQ8100 三重四極桿氣質(zhì)聯(lián)用儀在短鏈脂肪酸的測(cè)定中表現(xiàn)出色。該方法在檢出限、線性、精密度和回收率等方面均滿足實(shí)際檢測(cè)應(yīng)用的需求。通過(guò)優(yōu)化色譜和質(zhì)譜條件，該方法實(shí)現(xiàn)了對(duì)短鏈脂肪酸的快速、準(zhǔn)確檢測(cè)，為生物醫(yī)學(xué)、環(huán)境科學(xué)和食品科學(xué)等領(lǐng)域的研究提供了有力的技術(shù)支持。未來(lái)，該方法有望在更廣泛的領(lǐng)域得到應(yīng)用，為相關(guān)領(lǐng)域的研究提供重要的技術(shù)支持。
