基于安益譜 TQ8100 三重四極桿氣質(zhì)聯(lián)用儀的 226 種農(nóng)藥殘留檢測方法
一、方法背景與意義
農(nóng)藥在保障農(nóng)產(chǎn)品產(chǎn)量、防控病蟲害方面發(fā)揮重要作用，但過量或不當(dāng)使用導(dǎo)致的殘留問題，可能通過食物鏈危害人體健康，同時對生態(tài)環(huán)境造成潛在風(fēng)險。226 種常見管控農(nóng)藥涵蓋有機磷類（如敵敵畏、樂果）、有機氯類（如六六六、滴滴涕）、擬除蟲菊酯類（如氯氰菊酯、溴氰菊酯）、氨基甲酸酯類（如克百威、滅多威）及雜環(huán)類（如吡蟲啉、多菌靈）等多個類別，其在果蔬、谷物、畜禽產(chǎn)品中的多殘留同步檢測是食品安全監(jiān)管的核心技術(shù)需求。
安益譜 TQ8100 三重四極桿氣質(zhì)聯(lián)用儀憑借 “氣相色譜高效分離 + 三重四極桿精準(zhǔn)控離子” 的技術(shù)優(yōu)勢，可有效解決復(fù)雜基質(zhì)中多農(nóng)藥殘留的干擾問題，搭配 Anyeep GCMST 工作站的多反應(yīng)監(jiān)測（MRM）批量編輯功能，能實現(xiàn) 226 種農(nóng)藥的快速篩查與準(zhǔn)確定量。本研究基于該儀器建立多農(nóng)藥殘留檢測方法，通過優(yōu)化樣品前處理與儀器參數(shù)，滿足 GB 2763《食品安全國家標(biāo)準(zhǔn) 食品中農(nóng)藥最大殘留限量》對檢測靈敏度、準(zhǔn)確性的要求，為農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量安全監(jiān)管、企業(yè)自檢及第三方檢測提供可靠技術(shù)支撐。
安益譜TQ8100三重四極桿氣質(zhì)聯(lián)用儀
二、實驗部分
（一）儀器與試劑
- 核心儀器：安益譜 TQ8100 三重四極桿氣質(zhì)聯(lián)用儀（配備電子轟擊離子源 EI，支持 MRM、SIM 等多種檢測模式）；高效氣相色譜系統(tǒng)（含分流 / 不分流進(jìn)樣口、程序升溫柱箱、自動進(jìn)樣器）；高速均質(zhì)機（轉(zhuǎn)速≥10000r/min）；渦旋振蕩器；高速離心機（轉(zhuǎn)速≥15000r/min）；氮吹儀（控溫范圍 30-80℃，精度 ±1℃）；固相萃取裝置（含 N - 丙基乙二胺（PSA）固相萃取柱、C18 固相萃取柱，500mg/6mL）；0.22μm 有機相濾膜（尼龍材質(zhì)）。
- 試劑與材料：
- 標(biāo)準(zhǔn)品：226 種農(nóng)藥混合標(biāo)準(zhǔn)品（純度均≥98%），含內(nèi)標(biāo)物（如毒死蜱 - D10、馬拉硫磷 - D10、氯氰菊酯 - D6，純度≥99%），用于校正基質(zhì)效應(yīng)與儀器響應(yīng)波動；
- 溶劑：乙腈、正己烷、乙酸乙酯（均為色譜純）；無水硫酸鎂（分析純，經(jīng) 650℃灼燒 4h 除水，冷卻后密封保存）；氯化鈉（分析純，經(jīng) 550℃灼燒 4h 除雜）；甲酸（質(zhì)譜純）；
- 樣品：新鮮果蔬（如蘋果、黃瓜、菠菜）、谷物（如小麥、大米），采樣后立即勻漿，-20℃冷凍保存，24h 內(nèi)完成分析。
（二）標(biāo)準(zhǔn)溶液配制
- 混合標(biāo)準(zhǔn)儲備液：準(zhǔn)確移取 226 種農(nóng)藥單標(biāo)儲備液（1000mg/L）各 1.0mL，置于 100mL 容量瓶中，用正己烷 - 乙酸乙酯（1:1，V/V）混合溶劑定容，配制濃度為 10mg/L 的混合標(biāo)準(zhǔn)儲備液，于 - 20℃避光密封保存，有效期 3 個月。
- 混合標(biāo)準(zhǔn)中間液：移取 10.0mL 混合標(biāo)準(zhǔn)儲備液，用正己烷 - 乙酸乙酯（1:1，V/V）稀釋定容至 100mL，配制濃度為 1.0mg/L 的混合標(biāo)準(zhǔn)中間液，4℃避光保存，有效期 1 個月。
- 混合標(biāo)準(zhǔn)工作液：取混合標(biāo)準(zhǔn)中間液，用空白基質(zhì)提取液（如空白蘋果提取液）逐級稀釋，配制濃度梯度為 0.005mg/L、0.01mg/L、0.05mg/L、0.1mg/L、0.5mg/L、1.0mg/L 的系列工作液，每 1mL 工作液中加入 10μL 濃度為 0.1mg/L 的混合內(nèi)標(biāo)使用液，臨用現(xiàn)配，避免溶劑揮發(fā)導(dǎo)致濃度偏差。
（三）樣品前處理
采用 “QuEChERS（快速、簡便、廉價、有效、穩(wěn)定、安全）” 前處理方法，適配果蔬、谷物等不同基質(zhì)，具體步驟如下：
- 樣品稱量與提取：準(zhǔn)確稱取 10.00g 勻漿后的樣品于 50mL 離心管中，加入 10mL 乙腈（含 1% 甲酸），渦旋振蕩 1min，再加入 4g 無水硫酸鎂、1g 氯化鈉，高速均質(zhì) 2min（轉(zhuǎn)速 12000r/min），然后以 10000r/min 轉(zhuǎn)速離心 10min，收集上清液至另一 50mL 離心管中。
- 凈化（基質(zhì)分散固相萃取）：移取 5mL 上清液于 15mL 離心管中，加入 100mg PSA 吸附劑、100mg C18 吸附劑、300mg 無水硫酸鎂，渦旋振蕩 1min，以 8000r/min 轉(zhuǎn)速離心 5min，取 2mL 上清液置于氮吹管中。
- 濃縮與定容：將氮吹管置于 40℃氮吹儀中，吹至近干（剩余約 0.1mL），用正己烷 - 乙酸乙酯（1:1，V/V）混合溶劑定容至 1mL，渦旋混勻后過 0.22μm 有機相濾膜，轉(zhuǎn)移至含內(nèi)標(biāo)的進(jìn)樣瓶中，待 GC-MS/MS 檢測。
（四）儀器檢測條件
- 色譜條件：
- 色譜柱：安益譜毛細(xì)管柱（30m×0.25mm×0.25μm，固定相為 5% 苯基 - 95% 二甲基聚硅氧烷，耐溫上限 325℃）；
- 柱溫程序：初始溫度 40℃，保持 2min；以 25℃/min 升溫至 150℃；再以 5℃/min 升溫至 280℃，保持 8min；最后以 15℃/min 升溫至 310℃，保持 5min（確保高沸點農(nóng)藥完全流出）；
- 進(jìn)樣口溫度：280℃；
- 進(jìn)樣方式：分流 / 不分流進(jìn)樣（低濃度樣品不分流，高濃度樣品分流比 5:1）；
- 進(jìn)樣量：1μL；
- 載氣：高純氦氣（純度≥99.999%），恒流模式，流速 1.0mL/min；
- 溶劑延遲：3min（避免溶劑峰干擾低沸點農(nóng)藥檢測）。
- 質(zhì)譜條件：
- 離子源：電子轟擊離子源（EI），電子能量 70eV；
- 離子源溫度：230℃；
- 四級桿溫度：150℃；
- 傳輸線溫度：280℃；
- 檢測方式：多反應(yīng)監(jiān)測（MRM），針對 226 種農(nóng)藥分別優(yōu)化母離子、定量子離子、定性子離子及碰撞能量（如敵敵畏：母離子 m/z 220，定量子離子 m/z 109，碰撞電壓 15V；氯氰菊酯：母離子 m/z 419，定量子離子 m/z 163，碰撞電壓 25V），每個農(nóng)藥設(shè)定 2-3 對離子對，確保定性準(zhǔn)確性；
- 駐留時間：每個離子對駐留時間 0.02-0.05s（根據(jù)農(nóng)藥數(shù)量動態(tài)調(diào)整，保證每個色譜峰至少有 10 個數(shù)據(jù)點）；
- 碰撞氣：高純氮氣（純度≥99.999%），碰撞氣流量 1.5mL/min。
三、方法性能驗證
（一）檢出限（LOD）與定量限（LOQ）
在空白基質(zhì)（如蘋果、小麥）中添加低濃度混合標(biāo)準(zhǔn)工作液，按方法測定，以信噪比（S/N）=3 計算 LOD，S/N=10 計算 LOQ。結(jié)果顯示，226 種農(nóng)藥的 LOD 為 0.001-0.005mg/kg，LOQ 為 0.003-0.015mg/kg，其中有機磷類、擬除蟲菊酯類 LOD 低至 0.001-0.003mg/kg，均遠(yuǎn)低于 GB 2763 規(guī)定的最大殘留限量（MRLs），滿足痕量殘留檢測需求。
（二）線性范圍與相關(guān)系數(shù)
對 0.005-1.0mg/L 濃度梯度的標(biāo)準(zhǔn)工作液進(jìn)行測定，以農(nóng)藥濃度為橫坐標(biāo)（x），農(nóng)藥與對應(yīng)內(nèi)標(biāo)物的峰面積比值為縱坐標(biāo)（y）進(jìn)行線性回歸。結(jié)果表明，226 種農(nóng)藥的線性相關(guān)系數(shù)（R2）均≥0.997，其中有機氯類、氨基甲酸酯類 R2 可達(dá) 0.999 以上，說明方法在該濃度區(qū)間內(nèi)定量準(zhǔn)確性優(yōu)異，無明顯基質(zhì)抑制或增強效應(yīng)。
（三）精密度
- 重復(fù)性：在空白基質(zhì)中添加中濃度（0.1mg/L）混合標(biāo)準(zhǔn)液，平行制備 6 份樣品，測定后計算相對標(biāo)準(zhǔn)偏差（RSD）。結(jié)果顯示，所有農(nóng)藥的重復(fù)性 RSD 為 1.2%-4.8%，其中雜環(huán)類農(nóng)藥 RSD≤3.5%，有機磷類 RSD≤4.8%，均小于 5%，表明方法穩(wěn)定性良好，操作誤差可控。
- 中間精密度：由 2 名操作人員在不同時間（間隔 24h）使用同一臺儀器測定上述中濃度樣品，各平行 6 次，總 RSD 為 1.5%-5.2%，均≤6.0%，證明方法受人員、時間等操作條件波動影響小，適用性強。
（四）回收率
在空白基質(zhì)（蘋果、小麥）中分別添加低（0.01mg/L）、中（0.1mg/L）、高（0.5mg/L）三個濃度水平的混合標(biāo)準(zhǔn)液，按方法測定并計算回收率。結(jié)果顯示，226 種農(nóng)藥的回收率為 80%-115%，其中果蔬基質(zhì)中回收率集中在 85%-105%，谷物基質(zhì)中回收率≥80%，符合食品安全檢測中農(nóng)藥殘留分析 80%-120% 的回收率要求，基質(zhì)干擾得到有效控制。
四、結(jié)論
基于安益譜 TQ8100 三重四極桿氣質(zhì)聯(lián)用儀建立的 226 種農(nóng)藥殘留檢測方法，通過 QuEChERS 前處理優(yōu)化與 MRM 模式精準(zhǔn)檢測的技術(shù)組合，實現(xiàn)了多類別、多組分農(nóng)藥的高效分離與痕量定量。該方法具有檢出限低、線性范圍寬、精密度高、回收率穩(wěn)定的優(yōu)勢，適配果蔬、谷物等多種農(nóng)產(chǎn)品基質(zhì)，且前處理流程簡便、耗時短（單樣品前處理僅需 30min），滿足批量樣品快速篩查需求。
依托安益譜 TQ8100 的高靈敏度檢測性能與工作站的批量數(shù)據(jù)處理功能，該方法可有效支撐食品安全監(jiān)管部門的日常監(jiān)測、農(nóng)產(chǎn)品企業(yè)的質(zhì)量控制及第三方檢測機構(gòu)的合規(guī)性檢測。后續(xù)可進(jìn)一步拓展基質(zhì)適用性（如畜禽肉、水產(chǎn)品），結(jié)合自動進(jìn)樣系統(tǒng)與在線凈化技術(shù)，進(jìn)一步提升檢測效率，為農(nóng)產(chǎn)品農(nóng)藥殘留風(fēng)險防控提供更高效的技術(shù)解決方案。
