三重四極桿液質(zhì)聯(lián)用儀-基于 TQ9120 超高效液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜系統(tǒng)的 4 種硝基呋喃代謝物殘留測定方法
一、方法原理
4 種硝基呋喃代謝物（呋喃唑酮代謝物 AOZ、呋喃它酮代謝物 AMOZ、呋喃西林代謝物 SEM、呋喃妥因代謝物 AHD）在動物組織、水產(chǎn)品等基質(zhì)中多以結(jié)合態(tài)存在，需通過酸水解釋放游離態(tài)代謝物，再與 2 - 硝基苯甲醛（2-NBA）衍生形成穩(wěn)定的腙類衍生物。利用 TQ9120 超高效液相色譜系統(tǒng)的快速分離能力，在 C18 色譜柱上實現(xiàn) 4 種衍生物的高效分離，結(jié)合電噴霧離子源（ESI）與三重四極桿的多反應(yīng)監(jiān)測（MRM）模式，精準(zhǔn)捕獲目標(biāo)衍生物的特征離子對，以內(nèi)標(biāo)法定量。該原理可有效消除基質(zhì)干擾，滿足痕量殘留檢測的高靈敏度與高特異性要求，符合 GB/T 21311-2007 等相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)技術(shù)指標(biāo)。
安益譜TQ9120三重四極桿液質(zhì)聯(lián)用儀
二、儀器與試劑
（一）主要儀器
- 高速冷凍離心機(jī)；
- 渦旋振蕩器；
- 恒溫水浴鍋；
- 固相萃取裝置；
- 分析天平；
- 具塞離心管；
- 固相萃取柱；
- 0.22μm 有機(jī)系微孔濾膜；
- 氮吹儀。
（二）主要試劑
三、實驗步驟
（一）樣品前處理
（二）儀器條件設(shè)置
（三）標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制
（四）樣品測定
按儀器條件測定待測樣品溶液，根據(jù)保留時間與 MRM 離子對豐度比定性，通過基質(zhì)匹配標(biāo)準(zhǔn)曲線計算樣品中 4 種硝基呋喃代謝物的殘留量（單位：μg/kg）。
四、方法驗證
（一）線性關(guān)系
（二）檢測限（LOD）與定量限（LOQ）
（三）精密度
（四）準(zhǔn)確度
五、注意事項
- 衍生化控制：2 - 硝基苯甲醛需避光保存，衍生過程需嚴(yán)格控制溫度與時間（如 37℃16h 確保衍生完全），避免光照導(dǎo)致衍生劑分解；pH 調(diào)節(jié)至 7.0±0.2，過酸或過堿會影響衍生效率。
- 基質(zhì)效應(yīng)消除：采用基質(zhì)匹配標(biāo)準(zhǔn)曲線校正基質(zhì)效應(yīng)，高脂肪基質(zhì)（如豬肉）可在萃取前加入 5g 無水硫酸鈉除脂，或選用 MCX 固相萃取柱增強(qiáng)凈化效果。
- 儀器維護(hù)：TQ9120 的進(jìn)樣口隔墊每 50 針更換 1 次，色譜柱每使用 100 針后需在 50℃、100% 甲醇條件下沖洗 30min；每月用利血平標(biāo)準(zhǔn)品進(jìn)行質(zhì)譜靈敏度校準(zhǔn)，確保檢測穩(wěn)定性。
- 試劑與樣品保存：衍生劑溶液現(xiàn)配現(xiàn)用，標(biāo)準(zhǔn)品儲備液避免反復(fù)凍融；樣品采集后需立即勻漿并 - 20℃冷凍保存，24h 內(nèi)完成前處理，防止代謝物降解。
- 安全防護(hù)：實驗中涉及鹽酸、有機(jī)溶劑，需在通風(fēng)櫥內(nèi)操作，佩戴耐酸手套與護(hù)目鏡；衍生后的溶液含硝基化合物，需集中收集并按危廢處理。
