單四極桿液相色譜質譜聯(lián)用儀-使用SQ910LC-MS同時測定7種大環(huán)內酯類藥物的方法
一、方法原理
針對紅霉素、阿奇霉素、克拉霉素、羅紅霉素、麥迪霉素、乙酰螺旋霉素、地紅霉素 7 種大環(huán)內酯類藥物（14-16 元環(huán)結構，中等極性弱堿性），采用萃取凈化 - 單四極桿液質聯(lián)用技術：
- 基質凈化：食品樣品經乙腈提取 - 正己烷除脂，水樣通過 HLB 固相萃取柱富集，去除蛋白質、脂類干擾物；
- 分離檢測：C18 反相柱梯度洗脫分離后，經 SQ910 電噴霧離子源（ESI+）電離，以選擇離子監(jiān)測（SIM）模式靶向捕獲準分子離子峰；
- 定量方式：外標法或內標法（推薦紅霉素 - d7）校正基質效應，實現(xiàn)痕量準確定量。
二、儀器與試劑
（一）核心儀器
（二）關鍵試劑
類別 | 規(guī)格要求 | 用途 |
色譜試劑 | 甲醇、乙腈、甲酸（質譜級） | 流動相及提取溶劑 |
標準品 | 7 種目標物純度≥99%，紅霉素 - d7≥98% | 校準曲線與內標校正 |
凈化材料 | HLB 固相萃取柱（200mg/6mL）、無水硫酸鈉 | 樣品富集與脫水 |
緩沖劑 | 磷酸二氫鉀、正己烷 | pH 調節(jié)與除脂 |
（三）校準與測定
- 標準曲線：配制 0.5~200ng/mL 系列標準溶液，基質匹配曲線 R2≥0.998；
- 樣品測定：空白與樣品交替進樣，每 20 針插入中間濃度校準點（偏差≤20%）；
結果計算：外標法公式：ρ = (A×ρ?)/A?（A 為樣品峰面積，ρ?為標準濃度，A?為標準峰面積）。
關鍵注意事項
- 樣品穩(wěn)定性：-20℃冷凍保存，48h 內完成前處理，避免大環(huán)內酯類水解；
- SPE 柱操作：活化后保持柱床濕潤，干燥會使吸附效率下降 30% 以上；
- 儀器維護：每周清洗離子源，每 200 針校正質量軸，減少離子抑制；
- 基質校正：高脂肪樣品需采用基質匹配標準曲線，參照 GB 31650-2019 要求。
